Relazione annuale al PNI 2019

Laboratorio Nazionale di Riferimento per Campylobacter
IZS Abruzzo e Molise

Nome della Prova Interlaboratorio n° 1: 09/2019- Ricerca di Campylobacter in matrici animali

Matrici: feci bovine

Analiti: Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Campylobacter fetus
Sono stati inviati ad ogni laboratorio partecipante 15 campioni di feci : 10 campioni  positivi  di cui 4 contaminati con Campylobacter jejuni (concentrazione 10⁵/10⁶ ufc/g), 4 contaminati con Campylobacter coli (10⁶ -10⁷ufc/g), 2 contaminati con Campybacter fetus (10⁶-10⁷ ufc/g) e 5 campioni negativi per il microrganismo target e contaminati con E.coli e S.aureus (10⁴ ufc/g).

Luogo e periodo di svolgimento: I campioni sino stati inviati dall’IZSAM sede di Teramo il 4 giugno 2019. Il circuito è stato chiuso il 29/7/2019

Numero e tipo di laboratori partecipanti: hanno partecipato al circuito 17 laboratori IIZZSS

Follow up: 15 laboratori sui 17 iscritti al circuito, hanno inviato i risultati entro la data di scadenza prestabilita. Dei laboratori che hanno inviato i risultati, 13/15 (86,6%) hanno individuato correttamente tutti i campioni; 1 laboratorio ha indicato correttamente 13 campioni sui 15 esaminati e un laboratorio 11 campioni sui 15 esaminati. L’identificazione di specie, opzionale, è stata effettuata da 11/15 laboratori ; 9 dei quali hanno identificato correttamente tutti i 10 campioni positivi (4 Campylobacter Coli, 4 Campylobacter Jejuni e 2 Campylobacter Fetus),

Hanno partecipato al circuito i seguenti laboratori: IZS Lombardia-Emilia Romagna con 1 laboratorio (Bologna); IZS del Mezzogiorno con 2 laboratori (Portici, Monteforte Irpino); IZS PLV con 1 laboratorio (Torino); IZS Sicilia con 3 laboratori (Catania, Palermo, Barcellona), IZS Abruzzo e Molise con 5 laboratorio (Campobasso, Avezzano, Teramo, Pescara, Isernia); IZS Venezie con 3 laboratori (Bolzano Verona, Treviso).

Dei due laboratori che non hanno inviato i risultati, è risultato che il laboratorio 649 non ha inserito i risultati nei termini consentiti ma li ha comunicati in seguito e pur avendo tutti i risultati corretti, non è stato inserito nella valutazione. Il secondo laboratorio che non ha inserito i risultati era un laboratorio iscritto per la prima volta al circuito.

L’andamento dei ring test effettuati dai singolo laboratori nel quinquennio 2015-2019 è riportato in tabella seguente:

Tabella valutazione

Come si evince dalla tabella di valutazione 11/15 laboratori hanno avuto nell’arco di tempo considerato risultati valutati come “Eccellenti”, il laboratorio 643 è stato valutato ”Buono”. Tre laboratori pur essendo meno performanti sono tuttavia risultati alla valutazione complessiva “sufficiente”. Nessun laboratorio ha quindi ottenuto risultati non conformi o non accettabili.

Le performance nelle identificazione di specie sono enormemente migliorate nel corso degli anni.

Il prossimo ring test sarà ricerca di Campylobacter in calzari (utilizzati in allevamento avicolo).

Matrice: carne di pollo

Analiti: Campylobacter jejuni
Ogni laboratorio IIZZSS partecipante ha ricevuto 3 confezioni di omogeneizzato di pollo da 80 g ciascuno e 12 liofili contaminati.
Dagli omogeneizzati di pollo ogni laboratorio  ha  preparato 12 campioni contenenti ciascuno 10 g e ogni campione è stato  contaminato con il corrispondete liofilo
Dei 12 liofili,  8 erano positivi per Campylobacter jejuni a due livelli di contaminazione e 4 negativi. Dei  liofili positivi 4 contenevano C.jejuni 10² ufc/g , 4 contenevano C. jejuni 10⁴ufc/g e 4 erano contaminati con S.aureus ed E.coli 10⁴ufc/g (negativi).

Luogo e periodo di svolgimento: I campioni sino stati inviati dall’IZSAM sede di Teramo il 14 maggio 2019. Il circuito è stato chiuso il 27/7/2019

Numero e tipo di laboratori partecipanti: al circuito hanno partecipato 14 laboratori IIZZSS: IZSAM con 3 laboratori Teramo, Pescara, Campobasso), IZS Roma (1 laboratorio),IZS LER con 6 laboratori (Bergamo, Bologna, Brescia, Modena, Sondrio, Lugo), IZS PLV con Torino, IZS Sicilia (Catania) , IZS Venezie con 3 laboratori(Padova, Verona, Cordenons)

Follow up: Numerazione

Sono stati valutati i risultati di 8 laboratori sui 14  iscritti. I risultati dei laboratori 862, 715, 711, 925, 932 e 713 non sono stati inseriti nel sistema ma forniti al LNR Campylobacter via e-mail come concordato dopo colloquio telefonico riguardante anomalie di temperatura riscontrate nell’arrivo dei campioni e l’assenza o stentata crescita di colonie per un numero eccessivo di campioni. Dall’analisi condotta dal LNRC è risultato che i campioni contaminati con i liofili a carica infettante maggiore(10⁴ ufc/ml), sono stati correttamente rilevati da tutti i partecipanti, mentre i campioni a titolo basso (10² ufc/ml), sono risultati negativi o comunque con cariche molto inferiore al valore atteso.

Dall’insieme di informazioni raccolte, l’ipotesi più accreditata è che sia occorsa una anomalia durante lo smistamento/trasporto dei campioni per mezzo del corriere. I campioni, prelevati dal corriere presso l’IZSAM vengono portati in un punto di raccolta da cui poi partono i diversi corrieri diretti nelle varie destinazioni sul territorio. Si è ipotizzato che durante questo trasporto per alcuni corrieri coinvolti, i campioni non siano sempre stati mantenuti all’adeguata condizione di refrigerazione e/o possano anche aver avuto sbalzi termici a cui il microrganismo testato è estremamente sensibile. I laboratori interessati sono risultati a carico dello stesso corriere avvalorando l’ipotesi formulata.

I risultati dei laboratori che hanno inviato i risultati rispetto ai campioni positivi sono stati i seguenti: 

GRIGLIA Valutazione Zeta score:

Per i campioni n°1 e n° 8, 10 e 12 la totalità dei laboratori (100%) ha ottenuto valori soddisfacenti di z-score . Per i campioni 9 e 6 sono risultati soddisfacenti i risultati di  7/8 laboratori, per il campione 3  di 6/8 laboratori. Per il solo campione n.4 la gran parte dei laboratori ha riportato valori giudicati discutibili o insoddisfacenti.

Decisioni prese: Data l’anomalia riscontratasi è deciso di ripetere il circuito per tutti i laboratori i primi mesi del 2020 (anche se la numerazione era stata calendarizzata per il 2021) (al momento sospeso causa Covid-19 per cui si effettuerà appena possibile).Inoltre si ogni pacco di rilevatore di temperatura (data-logger), in modo che il dato sia rilevato per tutto il percorso.

Valutazione prestazioni complessive anni precedenti : Periodo 2015-2018

Anno 2018: Isolamento Campylobacter: 14 laboratori partecipanti tutti hanno individuato correttamente i campioni esaminati (100%)

Anno 2017: 28 laboratori partecipanti numerazione 26/28 (92,85%) hanno rilevato valori di z score soddisfacenti.

Anno 2016:numerazione Campylobacter: Su 12 laboratori partecipanti, 8 sono risultati avere z score soddisfacente , gli altri 4 risultati discutibili..

Anno 2015: Isolamento Campylobacter. Dal confronto dei risultati attesi e quelli forniti risulta che 10 dei 12 laboratori (83,3%) partecipanti hanno individuato correttamente tutti i 15 campioni.

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