FONTE: Laboratori Nazionali di Riferimento (LNR)
Laboratorio Nazionale di Riferimento per il controllo delle contaminazioni batteriche dei molluschi bivalvi
IZS Umbria e Marche
Partecipazione dei Laboratori italiani di controllo ufficiale dei molluschi bivalvi al circuito FoodEqa Shellfish Scheme per Escherichia coli e Salmonella spp. nel periodo 2018
Nel 2018 sono state distribuite in collaborazione con il Public Health England (PHE) di Londra e l'European Union Reference Laboratory for monitoring bacteriological and viral contamination of bivalve molluscs, tre distribuzioni del Proficiency Test FoodEQA Shellfish Scheme (SF059, SF060, SF061) per la numerazione di E. coli e la ricerca di Salmonella spp. nei molluschi bivalvi, alle quali hanno partecipato laboratori italiani di controllo ufficiale.
Ogni distribuzione prevede l’invio di due campioni per la numerazione di E. coli con metodo MPN e due campioni per l’analisi qualitativa di Salmonella spp. nei molluschi bivalvi. I campioni distribuiti sono rappresentati da LENTICULE™ contenenti batteri. Il tipo e la proporzione dei microrganismi presenti nei campioni è disegnata appositamente per rispecchiare quelli ritrovati nei campioni di molluschi bivalvi.
Per E. coli in MPN il range dei risultati attesi è determinato dal valore della mediana calcolata sui risultati inviati da tutti i partecipanti ± 2.68 Deviazioni standard (DS).
La valutazione della performance è effettuata sull’attribuzione di un punteggio numerico, dopo una valutazione statistica di tutti i risultati. Nello Shellfish Scheme viene attribuito un punteggio ai partecipanti sia per i risultati inviati per la numerazione di E. coli in MPN sia per la ricerca di Salmonella spp.
La valutazione della performance è effettuata sulla singola distribuzione (o campione) o per monitorare le performance nel tempo (punteggi cumulativi). Questi ultimi sono calcolati per ogni partecipante per E. coli e Salmonella tenendo conto della partecipazione alle ultime 3 distribuzioni. Performance inferiori al 40% nella singola distribuzione o al 70% nel punteggio cumulativo rispetto al punteggio massimo possibile sono indicative di problemi significativi nelle analisi.
Distribuzione SF059 (campioni SF0126 e SF0127)
Alla distribuzione SF059 hanno partecipato in totale 11 laboratori.
Per entrambi i campioni SF0126 e SF0127, tutti i laboratori hanno riportato valori MPN di Escherichia coli per l’analisi effettuata nel range dei risultati attesi (Tabella 1).
Nella ricerca di Salmonella spp., tutti i laboratori hanno individuato correttamente l'assenza di Salmonella spp. nel campione SF0126 e la presenza di Salmonella spp. nel campione SF0127 (Tabella 2).
Tabella 1 - Risultati ottenuti dai partecipanti nella numerazione di E. coli in MPN per i due campioni della distribuzione SF059
Tabella 2 - Risultati ottenuti dai partecipanti nella ricerca di Salmonella spp. per i due campioni della distribuzione SF059
Distribuzione SF060 (campioni SF0128 e SF0129)
Alla distribuzione SF060 hanno partecipato in totale 2 laboratori.
Per entrambi i campioni SF0128 e SF0129, i laboratori partecipanti hanno riportato i valori MPN di Escherichia coli per l’analisi effettuata nel range dei risultati attesi (Tabella 3).
Nella ricerca di Salmonella spp., i laboratori partecipanti hanno riportato correttamente la presenza di Salmonella spp. nei campioni SF0128 e SF0129 (Tabella 4)
Tabella 3 - Risultati ottenuti dai partecipanti nella numerazione di E. coli in MPN per i due campioni della distribuzione SF060
Tabella 4 - Risultati ottenuti dai partecipanti nella ricerca di Salmonella spp. per i due campioni della distribuzione SF060
Distribuzione SF061 (campioni SF0130 e SF0131)
Alla distribuzione SF061 hanno partecipato in totale 10 laboratori.
Per entrambi i campioni SF0130 e SF0131, tutti i laboratori che hanno effettuato le analisi hanno riportato entrambi i valori MPN di Escherichia coli per l’analisi effettuata in duplicato nel range dei risultati attesi (Tabella 5).
Nella ricerca di Salmonella spp., tutti i laboratori che hanno effettuato le analisi hanno riportato correttamente l'assenza di Salmonella spp. nel campione SF0130 e la presenza di Salmonella spp. nel campione SF0131 (Tabella 6).
Tabella 5 - Risultati ottenuti dai partecipanti nella numerazione di E. coli in MPN per i due campioni della distribuzione SF061
Tabella 6 - Risultati ottenuti dai partecipanti nella ricerca di Salmonella spp. per i due campioni della distribuzione SF061
Partecipazione dei Laboratori italiani di controllo ufficiale dei molluschi bivalvi al Ring Test LNR RT04-2018 per la numerazione di Escherichia coli e la ricerca di Salmonella spp. in matrice vongola
Nel 2018 LNR ha organizzato il Ring Test RT04 per la numerazione di E. coli e la ricerca di Salmonella spp. in matrice liofilizzata di vongola. Il Ring Trial è stato organizzato per fornire ai laboratori che effettuano le analisi dei molluschi bivalvi vivi dalle aree di produzione, secondo il Regolamento (CE) No. 854/2004, o lungo la filiera di produzione, secondo Regolamento (CE) 2073/2005 e successive modifiche, campioni per la valutazione esterna in qualità del laboratorio.
Il metodo di riferimento europeo per la numerazione di E. coli nei molluschi bivalvi è il metodo ISO 16649-3:2015, Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the enumeration of β-glucuronidase-positive Escherichia coli Part 3: Most probable number technique using 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-glucuronide. Il metodo di riferimento per la ricerca di Salmonella spp. nei mollushi bivalvi è il metodo ISO 6579-1:2017, Microbiology of the food chain – Horizontal method for the detection, enumeration and serotyping of Salmonella Part 1: Detection of Salmonella spp.
I campioni del Ring Test sono stati preparati come campioni liofilizzati di vongole in conserva sperimentalmente contaminati con Escherichia coli (104 MPN/100 g di campione ricostituito), Citrobacter freundii (10 UFC per ml di campione ricostituito) e Salmonella Typhimurium (100 UFC per ml di campione ricostituito) il campione MOLLU 07, Escherichia coli (103 MPN/100 g di campione ricostituito) e Citrobacter freundii (10 UFC per ml di campione ricostituito) il campione MOLLU 08.
Per la valutazione delle performance dei laboratori partecipanti è stato utilizzato un sistema di punteggio. Performance inferiori al 40% (<5/12) sono state ritenute indicative di problemi significativi nelle analisi.
Alla distribuzione RT04 2018 hanno partecipato in totale 24 laboratori.
Nella numerazione di E. coli, per il campione MOLLU 07, 21/24 laboratori hanno riportato entrambi i valori MPN di Escherichia coli per l’analisi effettuata nel range dei risultati attesi ( ± 3 Deviazioni standard), 3 laboratori hanno riportato un valore MPN di Escherichia coli nel range dei risultati attesi e un valore entro le 5DS. Per il campione MOLLU 08, 22/24 laboratori hanno riportato entrambi i valori MPN di Escherichia coli per l’analisi effettuata nel range dei risultati attesi (mediana ± 3 DS), 1 laboratorio ha riportato un valore MPN di Escherichia coli nel range dei risultati attesi e un valore entro la mediana e 5DS, un laboratorio ha riportato entrambi i valori MPN di Escherichia coli entro la mediana e 5 DS). Nell'analisi complessiva della distribuzione RT04, nessun laboratorio ha ottenuto un punteggio sfavorevole per la numerazione di E. coli, ma tutti i 24 laboratori hanno ottenuto una valutazione complessiva favorevole.
Nella ricerca di Salmonella spp. tutti i 24 laboratori partecipanti hanno riportato correttamente la presenza di Salmonella spp. nel campione MOLLU07 e l'assenza di Salmonella spp. nel campione MOLLU08. Gli esiti del Ring-Trial sono stati discussi e chiarimenti tecnici sono stati dati nel corso della riunione annuale dei laboratori operanti nel controllo dei molluschi bivalvi di Ancona del 14 Dicembre 2018.
Vedi anche