A cura di:
Direzione generale per l'igiene e la sicurezza degli alimenti e la nutrizione
Web editing:
M. DE MARTINO
Cap. 2B - LNR Brucellosi
Laboratorio Nazionale di Riferimento per le Brucellosi
Istituto Zooprofilattico Sperimentale dell’Abruzzo e del Molise
Via Campo Boario, 64100 Teramo
www.izs.it
1) Elenco delle attività di analisi
Il Laboratorio di Referenza Nazionale (LNR) delle Brucellosi effettua gli esami riportati nella tabella 1, distinti per metodo, su campioni di siero, di latte e di organi.
Tabella 1. Lista dei metodi impiegati per la ricerca di anticorpi/agente eziologico
| Analiti | Metodo | Riferimento |
|---|---|---|
| Ricerca di anticorpi anti-Brucella abortus e melitensis | siero-agglutinazione rapida (SAR) | D.M. 27/08/1994 n°651,D.M. 2/07/1992 n°453 |
| Ricerca di anticorpi anti-Brucella canis | siero-agglutinazione lenta (SAL) | SOP BACO35D di Weybridge |
| Ricerca di anticorpi anti-Brucella abortus e melitensis | fissazione del complemento (FDC) | D.M. 27/08/1994 n°651,D.M. 2/07/1992 n°453 |
| Ricerca di anticorpi anti-Brucella abortus RB51 | fissazione del complemento (FDC) | Metodo interno |
| Ricerca di anticorpi anti-Brucella ovis | fissazione del complemento (FDC) | OIE Cap.2.7.9 par.B 2 a) |
| Ricerca di anticorpi anti-Brucella abortus e melitensis | ELISA indiretta | Metodo interno |
| Ricerca di anticorpi anti-Brucella suis | ELISA indiretta | Metodo interno |
| Ricerca di anticorpi anti-Brucella abortus e melitensis | ELISA competitiva | Metodo interno |
| Isolamento di Brucella spp da materiale organico | Isolamento | Manuale OIE 2009 cap 2.4.3-B |
| Ricerca di Brucella spp | PCR | Metodo interno |
| Identificazione di specie e biovarianti di Brucella | Tipizzazione | Metodo interno |
| Tipizzazione molecolare di Brucella | PCR-RFLP | Metodo interno |
| Ricerca di anticorpi anti-Brucella nel latte bovino | Milk Ring test | Metodo interno |
2) Sistemi di gestione e controllo della qualità
Il LNR si avvale dei laboratori dell’IZSAM che sono accreditati secondo i requisiti della UNI CEI EN ISO / IEC 17025:2005.
I metodi utilizzati sono conformi a quelli descritti nei D.M.2 luglio 1992 n°453, D.M. 27 agosto 1994 n°651 e al capitolo 2.4.3, 2.7.2, 2.7.9 del Manual of diagnostic tests and vaccines for terrestrial animals (2009).
Il laboratorio partecipa alle prove interlaboratorio annuali, organizzate dal Laboratorio di Referenza Comunitario per i metodi sierologici (ANSES – Francia) su campioni di siero e latte e partecipa inoltre ai circuiti interlaboratorio per l’ identificazione dei ceppi isolati.
Il laboratorio effettua i controlli, su prodotto finito dei lotti di antigene utilizzati per la sieroagglutinazione rapida e per la fissazione del complemento (antigeni “UNICI”), utilizzando il Siero Nazionale Standard (SNS) e il Siero Internazionale Standard (OIESS), secondo quanto previsto dalla vigente normativa.
Nel 2009 il LNR ha avviato, inoltre, il processo di controllo delle attività diagnostiche della brucellosi presso gli altri IIZZSS svolgendo verifiche ispettive.
3) Modalità di pianificazione e la realizzazione delle prove interlaboratorio e di confronto
Il LNR organizza, sin dal 2000, annualmente, circuiti interlaboratorio per esami sierologici (SAR, FDC ed ELISA latte) e dal 2006 ha esteso i circuiti organizzati agli esami batteriologici (ricerca brucella agente etiologico). Al circuito sierologico aderiscono tutti i laboratori degli IIZZSS, che eseguono le prove sul territorio di competenza (circa 70 partecipanti), mentre ai circuiti per la ricerca dell’agente eziologico (Brucellosi-Alimenti e Brucellosi-Diagnostica) partecipano 13 laboratori che effettuano prove di igiene alimenti e 20 laboratori che eseguono prove di microbiologia diagnostica.
Le modalità di organizzazione dei circuiti sono riportate nel “Protocollo per l’esecuzione di prove valutative tra laboratori” disponibile on line sul sito www.izs.it dell’IZSA&M.
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